冰凍切片的方法
標本的處理：乳腺、子宮等大塊組織經取材,組織周邊加包埋劑置于組織樣品冷凍頭,當表面出現白色時表示組織已凍結即可切片。對小組織如腎穿刺的小組織,先取冷凍頭(樣品頭)加少許包埋劑置于速凍,用速凍器稍壓平,當出現硬結時即平放小組織,再次置于冷凍組織,這樣將小組織墊高,就能快速切出高質量的切片。
染色方法為HE染色法,步驟為:
切片用10%甲醛液固定30s
75%酒精30s
水洗
蘇木素溶液染細胞核2—3 min
水洗
1%鹽酸酒精分化
水洗
1%氨水液反藍
水洗
伊紅染細胞漿30s或1min
水洗
依次梯度酒精脫水
二甲苯透明一樹膠封固。
全自動冰凍切片機切片技巧
各種組織經凍結后,組織的硬度是不一樣的,組織切片的速度電不同軟的組織切片速度較慢,硬的組織切片速度較快。同時要選擇好鋒利無缺口的刀鋒，調節好防卷板與刀鋒的關系,經調節好刀鋒的角度。只要技術人員熟練掌握機器的各種部件的作用和性能,認識組織學結構,掌握好各種組織切片的適宜溫度,選擇好鋒利的刀鋒,以及調好刀鋒的角度,調節好刀鋒與防卷板的角度位置,配好固定液、促藍液、染色液等試劑,染色方法等,就能快速、準確地制作出的冰凍切片。
